Los productos farmacéuticos estériles se pueden clasificar enproductos esterilizados terminalmente, que se someten a una esterilización terminal durante su fabricación, yproductos fabricados asépticamente, en el que parte o la totalidad del proceso de producción se realiza en condiciones asépticas.

Siempre que sea posible, los productos estériles deben fabricarse utilizandoesterilización por calor terminal. Sin embargo, para productos-sensibles al calor,procesamiento asépticoofiltración estérilpueden adoptarse como métodos de esterilización alternativos.

Elvacuna trivalente contra rotavirusEs una vacuna viva atenuada que no puede someterse a esterilización terminal. Para garantizar la eficacia del producto, todo el proceso de fabricación se realiza en condiciones asépticas. Esto aumenta significativamente la complejidad operativa y requiere personal de fabricación altamente calificado.

La preparación del intermedio de la vacuna es una de las etapas más críticas en la formulación de la vacuna. La esterilidad de este proceso afecta directamente tanto a la seguridad del producto final como a los costes generales de fabricación. Por lo tanto, incorporar unapaso de filtración estérildurante la preparación intermedia es de gran importancia para garantizar la calidad del producto y al mismo tiempo reducir los riesgos de contaminación.

El procesamiento posterior eficiente se ha convertido en uno de los principales desafíos que enfrenta la industria biofarmacéutica en rápido crecimiento. El tamaño de partícula relativamente grande de los virus y de las partículas-similares a virus (aproximadamente100–400 nanómetro) aumenta aún más la complejidad de la filtración estéril.

 

 

 

Este estudio consistió endos fasesde experimentos de filtración a escala de laboratorio-en productos intermedios de la vacuna trivalente contra rotavirus para evaluar preliminarmente el impacto de introducir un paso de filtración estéril durante la preparación intermedia.

durante elprimera fase, los títulos de virus antes y después de la filtración se evaluaron utilizando diferentes tamaños de poro de membrana y materiales de membrana.

 

Con base en los resultados favorables obtenidos en la Fase I, elsegunda faseEmplearon filtros estériles con el mismo material de membrana y tamaño de poro al tiempo que ampliaron tanto la escala experimental como el número de lotes de producción. Se evaluaron los títulos de virus y las propiedades fisicoquímicas antes y después de la filtración. Además, se realizaron pruebas de retención bacteriana en la membrana seleccionada para determinar si la vacuna trivalente contra rotavirus afectaría el rendimiento de retención bacteriana del filtro.

La membrana de filtración utilizada en este estudio fue unaMembrana de fluoruro de polivinilideno (PVDF) de 0,22 μm. Se investigaron los efectos de la filtración estéril sobre el título, la apariencia, el pH, la osmolalidad y la claridad del virus, mientras que también se evaluó el rendimiento de la retención bacteriana.

Los resultados demostraron queFiltros estériles de PVDF de 0,22 μmteníaningún efecto significativosobre el título del virus, la apariencia, el pH o la osmolalidad del intermedio de la vacuna trivalente contra rotavirus. Sin embargo, ellosclaridad del producto significativamente mejorada, lo que indica que la filtración estéril puede mejorar eficazmente la calidad del producto sin comprometer la potencia de la vacuna.

 

Tabla 1. Comparación de títulos de virus antes y después de la filtración en seis lotes intermedios (Fase I)

 

 

Tabla 2. Análisis estadístico de títulos de virus antes y después de la filtración en dieciséis lotes intermedios (Fase II)

 

 

 

Tabla 3. Resumen de parámetros para la prueba de retención bacteriana

 

 

Nota:1.Volumen de filtración total=Caudal mínimo × Tiempo de recirculación + Volumen de filtración final.

 

Tabla 4. Resultados de la Prueba de Retención Bacteriana

 

 

Notas:

1.Nivel de desafío de la membrana=Concentración final de suspensión bacteriana × Volumen de filtración final / Área de filtración efectiva (13,8 cm²).

2.TNTCindica que el número de colonias fuedemasiado numerosos para contarlos (TNTC).

 

Discusión

Los medios de filtración, las condiciones del proceso y los filtros estériles son los tres factores principales que influyen en el rendimiento de la filtración esterilizante. Seleccionar un material de membrana que coincida con las características del intermedio de la vacuna trivalente contra rotavirus y las condiciones de proceso correspondientes es el requisito previo fundamental para una filtración estéril exitosa.

hidrófilofluoruro de polivinilideno (PVDF)Las membranas se utilizan ampliamente en la industria biofarmacéutica para la filtración esterilizante terminal debido a sualta permeabilidad, alto caudal, propiedades de baja unión de proteínas-, mínimos extraíbles y excelente compatibilidad química. Los resultados de este estudio demuestran además que la membrana de PVDF seleccionada se adapta bien a las características de los intermedios de la vacuna trivalente contra rotavirus. La filtración estéril usando esta membrana tuvoningún efecto significativosobre el título del virus o las propiedades fisicoquímicas, incluida la apariencia, el pH y la osmolalidad, mientras quemejorando significativamente la claridad del producto, contribuyendo así a mejorar la calidad de las vacunas.

 

El título de virus es uno de los atributos de calidad más críticos para las vacunas virales y sirve como indicador directo de la potencia del producto y la calidad general. En consecuencia, representa el parámetro más importante a la hora de evaluar el impacto de la filtración estéril.

 

Los resultados obtenidos de un total de22 lotes de filtración intermediademostró que el proceso de filtración preliminar que emplea unMembrana de PVDF de 0,22 μmsatisfizo completamente los requisitos del producto para los títulos deCepas virales G2, G3 y G4, así como el título de virus total combinado.

 

Estudios anteriores han informado que la filtración estéril puede ser una causa importante de pérdida de títulos de virus y que la concentración viral es uno de los factores que afectan el rendimiento de la filtración. En el presente estudio, se sometieron a filtración estéril intermediarios con diferentes rangos de títulos de virus. Los resultados indicaron que la filtración produjoninguna reducción estadísticamente significativa en el título de virusdentro de los siguientes rangos de concentración:

• Fase I:4,50–7,80 lgCCID₅₀/mL
• Fase II:4,70–8,10 lgCCID₅₀/mL

Estos hallazgos sugieren que se puede implementar la filtración estéril sin comprometer la potencia de la vacuna en los rangos de concentración de virus evaluados.

La vacuna trivalente contra rotavirus exhibidasin actividad bactericidacontraBrevundimonas diminutaATCC 19146. Con base en esta observación, se realizó un estudio de retención bacteriana.

Los resultados demostraron que la vacuna contra el rotavirusno afectó negativamente el rendimiento de la membrana de grado esterilizante- de PVDF hidrófilo de 0,22 μm. La membrana alcanzó con éxito el estándar de filtración de grado esterilizante-de retenciónMayor o igual a 1,0 × 10⁷Brevundimonas diminutaATCC 19146 células por cm² de área de filtración efectiva, confirmando que la formulación de la vacuna no compromete la capacidad de retención bacteriana del filtro esterilizante.

 

 

Referencia

Tong, Y., Chen, T., Fu, S.,et al. Aplicación preliminar de la filtración estéril en el proceso de producción de la vacuna trivalente contra rotavirus. Revista china de productos farmacéuticos, 2024, 55(1): 120–124. DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2024.01.016.